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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,制藥,綜合 |
PAGE上層膠染料1000×(0.2 mL)是一種專為聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)設計的高濃縮染料溶液,通常用于標記和可視化上層凝膠(濃縮膠)中的蛋白質樣品。該染料幫助研究人員在樣品加載和電泳過程中清楚地觀察樣品位置,確保電泳結果的準確性和可重復性。以下是關于該染料的詳細介紹。
PAGE上層膠染料1000×是一種高濃度的染料溶液,通常以0.2 mL的小體積形式提供。該染料在使用時需要根據(jù)實驗需求稀釋至工作濃度(通常為1×)。染料通常為藍色或綠色,能夠與蛋白質樣品緩沖液混合,用于在電泳過程中標記樣品的遷移位置。這有助于監(jiān)控電泳過程,確保樣品均勻加載并在電泳過程中保持良好的分離效果。
PAGE上層膠染料通常含有一種或多種酸性染料,如溴酚藍(Bromophenol Blue)或甲基綠(Methyl Green)。這些染料能夠與蛋白質樣品或樣品緩沖液結合,在電泳過程中隨著電流遷移,形成易于觀察的標記線。
樣品加載可視化:染料的主要作用是提供樣品加載時的視覺參考,確保每個樣品準確加載到凝膠的樣品槽中,防止交叉污染或樣品丟失。
電泳監(jiān)控:在電泳過程中,染料線隨著電流遷移,使研究人員能夠實時監(jiān)控電泳進展,并根據(jù)染料的遷移位置決定電泳結束的時間。
樣品遷移檢查:染料線的遷移情況有助于確認樣品是否按預期遷移,確保電泳的效果和數(shù)據(jù)的可靠性。
使用PAGE上層膠染料非常簡單,通常包括以下步驟:
稀釋染料:根據(jù)使用說明,將1000×濃縮染料稀釋至1×工作濃度。稀釋后的染料可以直接與樣品緩沖液混合使用。
樣品準備:將蛋白質樣品與樣品緩沖液混合后,再加入適量的1×染料溶液。常規(guī)做法是在每個樣品中加入1-2 µL的染料溶液。
樣品加載:將混合好的樣品緩慢加入到已制備好的PAGE凝膠的樣品槽中。染料幫助您準確加載樣品,并可視化樣品槽中的液面。
電泳運行:連接電泳設備,開始電泳。染料線將隨著電場遷移,您可以通過觀察染料線的位置來判斷樣品的遷移情況。
電泳結束:通常在染料線接近凝膠的下緣時結束電泳。根據(jù)實驗需求,您可以稍作調整以獲得最佳分離效果。
在蛋白質分析中,PAGE上層膠染料廣泛應用于SDS-PAGE和非變性PAGE實驗。它幫助研究人員在蛋白質電泳過程中準確加載樣品,并實時監(jiān)控樣品遷移情況,確保獲得清晰的分離條帶。
雖然該染料主要用于蛋白質電泳,但在某些情況下,也可以用于核酸電泳,幫助可視化小片段的DNA或RNA的遷移情況。
對于新手或經驗不足的研究人員,PAGE上層膠染料提供了寶貴的視覺反饋,幫助他們優(yōu)化電泳條件,減少操作錯誤,提高實驗成功率。
高濃縮,低用量:1000×的高濃縮形式意味著每次使用僅需少量即可,大大節(jié)省了實驗資源。
操作簡便:只需簡單稀釋和混合,即可在樣品準備過程中輕松使用。
可靠性高:通過可視化樣品的加載和遷移位置,提高了電泳實驗的重復性和可靠性。
正確稀釋:使用前必須將染料按說明稀釋至1×工作濃度,避免因過濃或過稀導致的樣品遷移異常或觀察困難。
避光保存:染料應避光儲存,避免長期暴露在光線下以防止染料降解。
穩(wěn)定性:染料溶液在使用時應盡量保持新鮮,建議在短時間內用完稀釋后的工作液。
PAGE上層膠染料1000×(0.2 mL)是蛋白質電泳分析中的重要工具,通過提供樣品加載和電泳過程中可視化標記,提高了實驗操作的精確性和結果的可靠性。該染料適用于多種PAGE實驗,尤其是在蛋白質和核酸的分離分析中,表現(xiàn)出色。其高濃縮、操作簡便和特點,使其成為實驗室日常蛋白質研究中的試劑。