人E選擇素(E-Selectin/CD62E)科研試劑盒：人E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA科研試劑盒是一種專門用于檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等生物樣本中E選擇素含量的工具。E選擇素是一種細胞黏附分子，主要在內皮細胞上表達，負責調節(jié)白細胞與血管壁的黏附過程，特別是在炎癥反應和免疫調控中發(fā)揮重要作用。該試劑盒采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）技術，具備高靈敏度和特異性，適用于基礎科研中對E選擇素的定量檢測，廣泛應用于炎癥、生物標志物、腫瘤學、心血管疾病等相關領域的研究。

二、E選擇素（E-Selectin/CD62E）背景信息

E選擇素是選擇素家族的一員，也被稱為CD62E，是一種在細胞間黏附過程中發(fā)揮關鍵作用的分子，特別在炎癥反應、白細胞遷移和腫瘤轉移中扮演重要角色：

1. 炎癥反應：E選擇素主要由活化的內皮細胞在炎癥狀態(tài)下表達，促進白細胞黏附到血管內皮，進而遷移到炎癥部位。

2. 免疫調控：在免疫反應過程中，E選擇素調節(jié)中性粒細胞、單核細胞和T淋巴細胞的遷移，參與先天性和適應性免疫反應。

3. 腫瘤轉移：E選擇素在腫瘤轉移中發(fā)揮了重要作用，通過與循環(huán)腫瘤細胞的結合，促進腫瘤細胞黏附到血管內皮并遷移到其他組織。

4. 心血管疾病：E選擇素在動脈粥樣硬化等心血管疾病的早期發(fā)揮作用，其表達水平的升高通常與疾病的炎癥狀態(tài)相關。

E選擇素在多種疾病的病理生理過程中均扮演了關鍵角色，檢測其表達水平可以為疾病的發(fā)生發(fā)展提供重要參考。

三、人E選擇素(E-Selectin/CD62E)科研試劑盒：原理

人E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA科研試劑盒采用雙抗體夾心法原理。微孔板中預包被有特異性抗E選擇素抗體，樣本中的E選擇素與包被抗體結合。洗滌后，加入酶標二抗，該二抗與E選擇素結合后，通過加入顯色底物反應形成顏色，顏色深淺與樣本中的E選擇素濃度成正比。最終使用酶標儀在450 nm波長下讀取吸光度，并根據標準曲線定量計算樣本中的E選擇素濃度。

四、試劑盒參數

1. 試劑盒名稱：人E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA科研試劑盒

2. 檢測原理：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）—雙抗體夾心法

3. 檢測靶標：E選擇素（E-Selectin/CD62E）

4. 樣本類型：血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等生物樣本

5. 檢測范圍：通常為 0.1-100 ng/mL，具體范圍依批次而定

6. 靈敏度：一般為 0.1-1.0 pg/mL，具體靈敏度以說明書為準

7. 樣本用量：50-100 µL，每孔

8. 檢測時間：3-5小時，具體依照操作步驟而定

9. 重復性：板內和板間變異系數(CV%)一般小于10%

10. 檢測波長：450 nm（帶570 nm或630 nm校正波長）

11. 標準曲線：通過標準品濃度梯度繪制標準曲線，用于定量分析

12. 保存條件：2-8°C保存，避免反復凍融

13. 有效期：6-12 個月，具體以批次說明書為準

14. 操作步驟：樣本加樣、抗原-抗體結合、洗滌、加酶標二抗、顯色反應、終止反應、讀數

15. 適用范圍：適用于科研中E選擇素含量檢測，廣泛應用于炎癥、免疫、腫瘤和心血管疾病等領域

五、試劑盒組成

1. 包被微孔板：預包被有針對E選擇素的特異性抗體，用于捕獲樣本中的E選擇素。

2. 標準品：提供不同濃度的E選擇素標準品，用于繪制標準曲線。

3. 酶標二抗：與E選擇素結合的酶標抗體，用于檢測抗原-抗體復合物。

4. 洗滌液：用于洗滌微孔板，去除未結合的物質，降低背景信號。

5. 顯色底物：TMB底物，通過酶促反應生成顏色。

6. 終止液：用于終止顯色反應，確保顏色穩(wěn)定。

7. 樣品稀釋液：用于樣本稀釋，確保樣本濃度在檢測范圍內。

8. 使用說明書：提供詳細操作步驟和注意事項。

六、操作步驟

1. 樣品準備：根據說明書稀釋樣本和標準品，確保樣本濃度適當。

2. 加樣：將樣本和標準品加入微孔板中，每個樣本建議做重復實驗。

3. 孵育：在合適溫度下孵育，確保E選擇素與捕獲抗體結合。

4. 洗板：使用洗滌液清洗微孔板，去除未結合的物質。

5. 加酶標二抗：加入酶標二抗后，孵育并再次洗板。

6. 顯色反應：加入顯色底物，通過酶促反應產生顏色。

7. 終止反應：加入終止液，停止顯色反應，固定結果。

8. 讀數：在酶標儀上讀取450 nm波長的吸光值，并通過標準曲線計算樣本中的E選擇素濃度。

七、試劑盒優(yōu)勢

1. 高靈敏度：試劑盒檢測靈敏度高，能夠檢測低濃度的E選擇素，適用于低豐度樣本的檢測。

2. 特異性強：雙抗體夾心法保證了對E選擇素的特異性檢測，避免交叉反應。

3. 操作簡便：操作步驟清晰，便于常規(guī)實驗室進行檢測。

4. 重復性好：板內和板間變異系數低，確保了實驗結果的穩(wěn)定性和一致性。

5. 應用廣泛：適用于多種類型的樣本，如血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等，廣泛應用于炎癥、腫瘤、心血管疾病等研究領域。

八、應用領域

1. 炎癥研究：E選擇素在炎癥反應中的作用研究，特別是與白細胞黏附和遷移相關的機制。

2. 心血管疾病研究：E選擇素在動脈粥樣硬化及其他心血管疾病中的早期標志物作用研究。

3. 腫瘤學研究：研究E選擇素在腫瘤轉移中的作用，特別是其對循環(huán)腫瘤細胞的黏附作用。

4. 免疫學研究：E選擇素在免疫細胞遷移、免疫反應中的調節(jié)作用。

5. 藥物篩選：用于評估新藥對E選擇素表達和功能的調節(jié)作用，特別是抗炎藥和抗癌藥的研究。

九、注意事項

1. 操作前應仔細閱讀說明書，嚴格按照步驟操作。

2. 樣本在檢測前應避免反復凍融，以確保實驗結果的準確性。

3. 實驗過程中避免樣本交叉污染，特別是在加樣和洗板時要特別注意。

4. 試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷。

5. 試劑盒中的標準品和試劑不能與其他批次混用，以確保實驗的可靠性。

十、總結

人E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA科研試劑盒是一款高效靈敏的檢測工具，適用于炎癥反應、心血管疾病和腫瘤等多種領域的研究。通過定量檢測E選擇素的水平，科研人員可以深入探討其在多種疾病中的作用機制，并為相應的疾病研究提供重要的生物標志物參考。