PBS 緩沖液(Phosphate Buffered Saline,磷酸鹽緩沖液)是一種常用的實驗室緩沖溶液,主要由磷酸鹽、氯化鈉(NaCl)和通常情況下還有(KCl)組成。PBS 緩沖液的主要功能是維持生物樣品或?qū)嶒烍w系的pH值穩(wěn)定,同時提供一定的離子強度和滲透壓,使其接近生理條件(如體內(nèi)的細胞環(huán)境)。由于PBS的成分和濃度與體液相似,因此它在許多生物學和生物化學實驗中被廣泛使用。
PBS 緩沖液:的成分與配制
典型的PBS溶液配方包括以下成分:
(NaH2PO4):用于提供磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。
(Na2HPO4):一起調(diào)節(jié)溶液的pH值,通常保持在7.4左右。
氯化鈉(NaCl):提供生理濃度的鈉離子和氯離子,幫助維持細胞外液的滲透壓。
(KCl)(可選):用于提供額外的鉀離子,進一步模擬體液中的電解質(zhì)平衡。
PBS的典型濃度通常為1X,即標準工作濃度。此外,還有10X或20X的濃縮形式,在使用前需稀釋到1X。
PBS緩沖液:的主要應(yīng)用
PBS緩沖液在生物學實驗中有多種應(yīng)用:
細胞培養(yǎng):用于洗滌細胞,去除培養(yǎng)基中的殘余成分而不改變細胞的狀態(tài)。
免疫組化:用于洗滌組織切片,保持細胞結(jié)構(gòu)的完整性和抗原抗體反應(yīng)的特異性。
分子生物學實驗:作為DNA、RNA或蛋白質(zhì)的稀釋液或反應(yīng)緩沖液,維持穩(wěn)定的pH和離子環(huán)境。
樣品儲存:短期儲存生物樣品,以防止pH波動導致樣品降解或失活。
PBS的特點
PBS由于其近似生理條件的特性,不會對細胞或生物分子產(chǎn)生明顯的刺激或毒性。與其他緩沖液相比,PBS的制備簡單、成本低廉、成分穩(wěn)定,因而在科研領(lǐng)域具有廣泛的適用性。
注意事項
盡管PBS 緩沖液用途廣泛,但在某些情況下并不適用。例如,在鈣離子或鎂離子對實驗至關(guān)重要的場合,PBS可能需要調(diào)整或替代。此外,長時間暴露于空氣中可能導致緩沖液中的CO2吸收,從而降低pH值,因此使用時應(yīng)盡量密閉保存,并避免長期存放。
總之,PBS 緩沖液是一種多功能的實驗室試劑,能夠為各種生物實驗提供穩(wěn)定的pH環(huán)境和適宜的滲透壓條件,使實驗過程更加穩(wěn)定和可靠。