技術文章
Technical articles在細胞培養(yǎng)實驗中,細胞的傳代和收獲是日常工作的重要環(huán)節(jié)之一,而酶消化是這一過程的關鍵步驟。Gibco TrypLE™ Select 酶 (1X),無酚紅,500 mL (產品編號12563029)是一種廣泛應用于細胞解離的酶制劑。本文將詳細介紹該產品的特點、應用、操作方法,以及其在細胞培養(yǎng)中的優(yōu)勢和重要性。
Gibco TrypLE™ Select 酶是一種替代傳統(tǒng)胰蛋白酶(Trypsin)的重組酶,專為哺乳動物細胞的溫和解離而設計。這款酶制劑不含動物來源的成分,消除了胰蛋白酶帶來的動物源污染風險,同時保持了高效的細胞解離能力。TrypLE™ Select 酶的溫和作用不僅有助于維持細胞表面蛋白的完整性,還能減少細胞損傷,使其成為細胞培養(yǎng)中的理想選擇。
產品名稱: Gibco TrypLE™ Select 酶 (1X),無酚紅
規(guī)格: 500 mL
產品編號: 12563029
品牌: Gibco
Gibco TrypLE™ Select 酶是由重組技術生產的,不含任何動物來源成分。這一特性顯著降低了因動物源污染帶來的實驗風險,特別適用于對無菌性和純凈度要求細胞培養(yǎng)實驗,如生物制藥和基因治療的細胞生產過程。
該產品不含酚紅,這一特性使其特別適合敏感實驗,如熒光顯微鏡觀察和細胞活力測定。無酚紅配方還避免了酚紅在某些實驗中可能產生的干擾,提高了實驗結果的可靠性。
TrypLE™ Select 酶具備溫和但有效的解離能力,能夠在較短時間內解離細胞,同時保持細胞膜和表面受體的完整性。與傳統(tǒng)的胰蛋白酶相比,TrypLE™ Select 酶在37°C下可以長時間使用,而不會失去活性或過度損傷細胞。
傳統(tǒng)的胰蛋白酶在使用后需要用血清或專用抑制劑中和,以防止持續(xù)消化導致細胞損傷。而TrypLE™ Select 酶在消化完成后無需中和,只需通過移除酶溶液即可停止消化過程。這一特性簡化了操作步驟,減少了實驗時間,并降低了因中和步驟不當引起的細胞損傷風險。
Gibco TrypLE™ Select 酶經過嚴格的質量控制,保證每批次產品的活性和穩(wěn)定性一致。這種一致性對于需要高重復性實驗結果的研究至關重要,尤其是在工業(yè)化生產和大規(guī)模細胞培養(yǎng)中。
Gibco TrypLE™ Select 酶適用于多種細胞類型的解離和傳代操作。以下是其常見應用領域:
TrypLE™ Select 酶廣泛用于哺乳動物細胞的傳代操作,包括貼壁細胞和懸浮細胞。其溫和的解離作用減少了細胞表面蛋白質和受體的損傷,使其在保持細胞功能的同時,實現高效的細胞解離。
在原代細胞培養(yǎng)中,TrypLE™ Select 酶被用于從組織塊中解離出單個細胞。與傳統(tǒng)胰蛋白酶相比,它能夠更溫和地處理組織,減少細胞損傷,提高細胞的存活率和后續(xù)實驗的成功率。
由于其不含動物成分的特點,TrypLE™ Select 酶特別適合用于生物制藥過程中的細胞培養(yǎng)操作,確保生產過程中的高純凈度和安全性。這對于基因治療、疫苗生產和單克隆抗體的工業(yè)化生產尤為重要。
在CRISPR基因編輯和其他細胞工程實驗中,TrypLE™ Select 酶用于解離和處理工程化細胞,確?;蚓庉嫼蟮募毎軌虮3指呋钚院驼9δ?。
預熱酶液: 在使用前,將TrypLE™ Select 酶預熱至37°C。
去除培養(yǎng)基: 從細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中吸除培養(yǎng)基,使用無菌PBS(磷酸鹽緩沖液)輕輕沖洗細胞兩次,以去除殘留的血清和培養(yǎng)基成分。
添加TrypLE™ Select 酶: 加入足量的TrypLE™ Select 酶溶液,確保覆蓋細胞層。
孵育: 將培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶放入37°C的培養(yǎng)箱中孵育。孵育時間因細胞類型和密度而異,通常為2-10分鐘。可以通過顯微鏡觀察細胞的解離情況,確定適當的孵育時間。
終止消化: 當細胞開始脫落時,輕輕敲擊培養(yǎng)皿或瓶體,促進細胞脫落。然后吸除酶液,添加含有血清的培養(yǎng)基懸浮細胞,血清中的蛋白質成分將中和殘留的酶活性。
收集細胞: 將細胞懸液轉移至離心管中,離心(通常1000 rpm,5分鐘)收集細胞,然后重新懸浮于新鮮培養(yǎng)基中。
存儲條件: TrypLE™ Select 酶應儲存在2-8°C環(huán)境中,避免冷凍。
使用期限: 在適當存儲條件下,產品的使用期限為瓶身標注的有效期內。確保每次使用后立即密封瓶蓋,避免產品長時間暴露在空氣中。
TrypLE™ Select 酶作為傳統(tǒng)胰蛋白酶的替代品,提供了更高的安全性和可靠性。無動物源成分不僅減少了污染風險,還符合嚴格的實驗和生產標準,特別適合GMP環(huán)境下的應用。
與胰蛋白酶不同,TrypLE™ Select 酶在使用后無需中和,這簡化了細胞解離的操作流程,減少了實驗過程中的步驟,降低了操作時間和成本。
TrypLE™ Select 酶對細胞表面蛋白質和受體的溫和處理,使其特別適合需要高活性和低損傷的細胞實驗。這對于免疫學研究、細胞功能分析和高通量篩選等實驗尤為重要。
Gibco品牌保證了TrypLE™ Select 酶在生產中的高度一致性,這對于需要高重復性和可靠性的研究和生產過程具有重大意義。實驗室和工業(yè)用戶可以依賴該產品的穩(wěn)定性和高性能來確保實驗成功。
TrypLE™ Select 酶已被廣泛應用于全球眾多科研機構和生物制藥公司,在免疫細胞研究、腫瘤學、干細胞研究和基因治療中取得了顯著成果。其性能和操作簡便性得到了用戶的。
例如,在免疫細胞治療研究中,TrypLE™ Select 酶被用于溫和地解離T細胞和NK細胞,確保細胞表面抗原的完整性和功能性,極大地提高了細胞治療的效果和安全性。
Gibco TrypLE™ Select 酶 (1X),無酚紅,500 mL(產品編號12563029)是細胞培養(yǎng)實驗中理想的酶解離試劑。其無動物源成分、溫和的細胞解離能力和簡化的操作流程,使其成為傳統(tǒng)胰蛋白酶的替代品。無論是在基礎研究、臨床應用還是生物制藥中,TrypLE™ Select 酶都能為用戶提供可靠的性能和優(yōu)異的實驗結果。如果您的實驗室需要一種高效、安全且操作簡便的細胞解離酶,Gibco TrypLE™ Select 酶將是您的選擇。