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Technical articlesGibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅 是一種高效的細胞解離溶液,專為體外培養(yǎng)的哺乳動物貼壁細胞設(shè)計。該產(chǎn)品結(jié)合了胰蛋白酶的蛋白水解功能與EDTA的螯合作用,能夠有效地解離細胞,使其從培養(yǎng)基底分離,同時保持細胞的活性和完整性。酚紅指示劑的加入幫助監(jiān)測溶液的pH變化,確保細胞在最佳條件下操作。此產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于細胞傳代、單細胞懸液制備、細胞分離以及組織消化等實驗中。
1. 高效細胞解離:
胰蛋白酶是一種從豬胰臟中提取的蛋白水解酶,能夠有效切割細胞與培養(yǎng)容器表面之間的蛋白質(zhì)連接,使貼壁細胞快速、溫和地從基底上脫離。此高效解離作用確保了細胞傳代和單細胞懸液制備的快速和高效完成。
2. EDTA 的螯合作用:
EDTA(乙二胺四乙酸)是一種螯合劑,能夠螯合培養(yǎng)基中的二價陽離子(如Ca2?和Mg2?),進一步降低細胞間和細胞與培養(yǎng)基底之間的黏附力。這種作用使得細胞解離更加溫和,減少了對細胞表面結(jié)構(gòu)的損傷,特別適用于對細胞表面抗原敏感的實驗。
3. 含酚紅的pH指示劑:
酚紅是一種常用的pH指示劑,能夠隨著溶液pH的變化而改變顏色。Gibco 胰蛋白酶-EDTA 溶液中含有酚紅,研究人員可以通過顏色變化直觀地監(jiān)測操作過程中溶液的pH,確保細胞在適宜的pH范圍內(nèi)操作,從而減少細胞應(yīng)激反應(yīng)和損傷。
4. 即用型液體溶液:
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 為即用型液體溶液,使用方便,無需進一步配制。研究人員只需將其直接應(yīng)用于細胞解離操作,大大簡化了實驗流程,節(jié)省了時間并減少了潛在的誤差。
1. 細胞傳代:
胰蛋白酶-EDTA 溶液是貼壁細胞傳代過程中工具。通過將其應(yīng)用于細胞培養(yǎng)基底,可以迅速將貼壁細胞從培養(yǎng)基底上解離,并保持細胞的完整性和活力。此方法被廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物細胞的傳代操作,如腫瘤細胞、干細胞和原代細胞的培養(yǎng)。
2. 單細胞懸液制備:
在細胞生物學研究中,制備單細胞懸液是一個重要步驟,尤其是在流式細胞術(shù)和細胞分選實驗中。Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 可以高效地將貼壁細胞解離為單個細胞,便于后續(xù)的細胞分析和處理。
3. 細胞分離和純化:
胰蛋白酶-EDTA 溶液在細胞分離和純化實驗中也發(fā)揮著關(guān)鍵作用。它提供溫和的細胞解離條件,確保細胞的高存活率和功能完整性,特別是在涉及細胞表面抗原檢測的實驗中,其溫和的作用機制減少了抗原的降解。
4. 組織消化和細胞分離:
該溶液還可以用于小塊組織的消化,從組織樣品中分離出單個細胞,用于進一步的研究和分析。這在組織工程、干細胞研究和細胞治療等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用。
1. 使用方式:
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 為即用型液體溶液,常用于細胞傳代和解離。使用時,將培養(yǎng)基移除,加入適量的胰蛋白酶-EDTA 溶液覆蓋細胞單層。在37°C培養(yǎng)箱中孵育,觀察細胞形態(tài)變化,通常幾分鐘內(nèi)細胞會變圓并從基底上脫落。隨后,加入含血清的培養(yǎng)基中和酶作用,以保護細胞免受過度解離的影響。接著,將細胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中進行后續(xù)處理,如離心、重新接種等。
2. 儲存條件:
胰蛋白酶-EDTA 溶液應(yīng)儲存在2-8°C的冰箱中,避免凍存和反復(fù)凍融,以保持其活性和穩(wěn)定性。開封后應(yīng)盡快使用,并確保瓶口密閉,以防止污染。
3. 注意事項:
在使用胰蛋白酶-EDTA 溶液時,應(yīng)確保細胞解離的時間和溫度適當,以避免過度解離造成細胞損傷。建議在無菌條件下操作,以避免溶液污染。不同細胞類型可能需要調(diào)整孵育時間,以獲得最佳解離效果。
1. 溫和高效的細胞解離:
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 結(jié)合了胰蛋白酶的高效蛋白水解功能和EDTA的溫和螯合作用,提供了有效而溫和的細胞解離條件,特別適合需要保護細胞表面抗原的實驗。
2. 含酚紅指示劑,易于監(jiān)控:
酚紅指示劑的存在使得研究人員能夠直觀地監(jiān)測溶液的pH變化,確保細胞在最適宜的pH環(huán)境下操作,從而提高細胞的存活率和實驗成功率。
3. 即用型設(shè)計,操作簡便:
即用型液體溶液設(shè)計簡化了實驗操作,研究人員無需進行額外配制,直接使用,適合日常細胞傳代和單細胞懸液制備。
4. 適用范圍廣泛:
無論是常規(guī)的細胞傳代、單細胞懸液的制備,還是更復(fù)雜的細胞分離和組織消化實驗,Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 都能夠提供穩(wěn)定的性能和可靠的實驗結(jié)果。
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅(100 mL,貨號:25200056)是一款專為細胞培養(yǎng)設(shè)計的高效細胞解離溶液,結(jié)合了胰蛋白酶和EDTA的優(yōu)點,為細胞傳代、單細胞懸液制備以及細胞分離提供了溫和且有效的解離條件。其無血清、成分確定的配方減少了實驗中的變異性,提供了高度一致和可重復(fù)的結(jié)果。作為一種即用型液體溶液,Gibco 胰蛋白酶-EDTA 操作簡便,適合多種細胞類型的培養(yǎng)需求,是細胞生物學研究中的工具。